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      技術文章

      ELISA試劑盒實驗該如何加樣和溫育?

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             ELISA試劑盒具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。
        ELISA試劑盒實驗標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在一、二孔平分別加標準品100μl,然后在一、二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從一孔、二孔中各取100μl分別加到三孔和四孔,再在三、四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在三孔和四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,ELISA試劑盒再在第五、第六孔平分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔平分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔平分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為90ng/L,60ng/L ,30ng/L,15ng/L,7.5ng/L)。
        ELISA試劑盒實驗加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其他各步操作相同)、待測樣品孔。
        配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
        洗滌:當心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
        酶聯免疫ELISA試劑盒是選用酶聯免疫法和化學顯色兩種技術復合查看的,對通常食物、藥品中殘留的農藥、重金屬、食物添加劑等都能進行有用的定型分析。
        選用多路管線光源、進口濾光片等搶先地光譜儀器技術。
        加酶:每孔參與酶標試劑50μl,空白孔在外。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品畢竟稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,悄悄晃動混勻。
        ELISA試劑盒實驗溫育:ELISA試劑盒用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
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