關(guān)于生物化學檢測試劑盒的反應(yīng)原理你了解嗎？

　　生物化學檢測試劑盒采用微生物方法，在微孔板種定量檢測食品、藥品和飼料中的生物素總量(包括添加和原生生物素)。所有所需的試劑均包含在試劑盒中。本試劑盒共能提供96次檢測(包括標準品)。使用ELISA reader (610 - 630 nm 或者540 - 550 nm)進行讀數(shù)。
 

　　生物化學檢測試劑盒的反應(yīng)原理：
 

　　對于延遲區(qū)來講，無規(guī)律可尋，對于指標檢測沒有意義。
 

　　等速區(qū)對應(yīng)的指標檢測方法是速率法。速率法又稱連續(xù)監(jiān)測法，是在測定酶活性或用酶法測定代謝產(chǎn)物時，連續(xù)選取時間-吸光度曲線中線性期內(nèi)4個以上測光點作為讀數(shù)點，并以單位時間吸光度變化值計算結(jié)果。線性期就是此期間內(nèi)各測光點之間的吸光度差值相等，此線性期對酶促反應(yīng)的底物來說屬于零級反應(yīng)。其測光點一般設(shè)置在加入啟動因子并孵育一段時間后開始，持續(xù)1-3min，一般應(yīng)用于酶類項目，可以使用因數(shù)法來計算待測濃度。
 

　　過渡區(qū)對應(yīng)是固定時間法，是終點法中存在一種特殊情況，指在時間-吸光度曲線上選擇兩個讀數(shù)點，此兩點既非反應(yīng)初始吸光度亦非平衡點吸光度，這兩點的吸光度差值用于結(jié)果計算。目的是解決某些化學反應(yīng)的非特異性問題，提高準確度。
 

　　平衡區(qū)對應(yīng)的是終點法，按測光點的個數(shù)分為：一點終點法、兩點終點法。
 

　　一點終點法是指在反應(yīng)到達平衡點，即在時間-吸光度曲線上吸光度不再改變時，選擇一個測光點計算待測物質(zhì)濃度。
 

　　兩點終點法常應(yīng)用于雙試劑的測定項目中，多數(shù)一試劑通常只含緩沖液等成分，它與樣本一般不起特異性反應(yīng);因此在二試劑加入前，選擇一個測光點作為一讀數(shù)點，此時的吸光度相當于樣品空白。加入二試劑后待測物質(zhì)起反應(yīng)，并經(jīng)過一定時間反應(yīng)到達平衡點，此時選擇二個讀數(shù)點，兩讀數(shù)點吸光度之差用于計算待測物質(zhì)濃度。
 

　　兩點法能有效消除樣品溶血、黃疸、脂濁等造成的光吸收干擾。如：酶法測定葡萄糖、總膽固醇、甘油三酯、尿酸、肌酐，以及化學法測定總蛋白、總膽紅素、直接膽紅素、鈣、磷、鎂、鐵等;并且都能在加入二試劑后的2-5 min內(nèi)達到反應(yīng)終點。