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技術(shù)文章

2019
12-25

ELISA試劑盒在冬季應(yīng)如何保存？
ELISA試劑盒在冬季的保存方法：1.要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其有相似過氧化物的活性，因而，在以HRP為符號酶的ELISA試劑盒測定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很簡單在溫育進(jìn)程中吸附于固相，然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。2.樣本的收集及血清分離中要留意盡量防止細(xì)菌污染，一則細(xì)菌的成長，其所排泄的一些酶或許會(huì)對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化作用；二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會(huì)對用相應(yīng)酶作符號的測定辦法發(fā)生非特異性攪擾。...
2019
10-26

ELISA試劑盒試驗(yàn)中常用到的封閉液配置方法
ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)中的封閉液小知識(shí)：ELISA試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液，一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點(diǎn)，蔗糖封閉的原理：1、elisa實(shí)驗(yàn)中，蔗糖本身沒有封閉作用;2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。3、加蔗糖的主要目的是保護(hù)ELISA板子吸附(包被)的蛋白，起到“保護(hù)劑”的作用。4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過BSA封閉后加，當(dāng)然也有將蔗糖加到封閉液中同時(shí)進(jìn)行處理;那一種更好需要你實(shí)驗(yàn)后來驗(yàn)證。但多數(shù)選擇前者。封閉劑還可用5%的脫...
2019
9-25

如何保證ELISA試劑盒使用的安全性？
ELISA試劑盒中抗體有包被抗體和酶標(biāo)抗體,這兩種抗體是一種抗體,前者沒有酶標(biāo),后者用酶進(jìn)行了標(biāo)記.NCM-ELISA一般有一抗和二抗,這兩種抗體不一樣,前者（一抗）一般是鼠抗體或兔抗體,沒有酶標(biāo),相對應(yīng)的二抗一般是羊抗鼠或羊抗兔抗體,用酶進(jìn)行標(biāo)記.也有用馬大規(guī)模備抗體的.TDS-ELISA是三抗體ELISA,第三級的抗體是將信號級聯(lián)放大.以上三種是比較常見的,還有其他一些試劑盒,可參考免疫學(xué)的內(nèi)容.一、保證ELISA試劑盒安全性的方法：1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一...
2019
9-20

ELISA試劑盒的清潔會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果
ELISA試劑盒通常情況下又被稱為酶聯(lián)免疫試劑盒，ELISA檢測試劑盒等等，自問世以來，就的達(dá)到了科研人員的大力認(rèn)可。ELISA實(shí)驗(yàn)法近幾年來被廣泛應(yīng)用于各個(gè)領(lǐng)域的免疫學(xué)檢測方面，尤其是當(dāng)它檢測的特異性被提高，越來越被人們接受和使用。ELISA試劑盒的清潔直接影響到了試驗(yàn)成果，關(guān)于一項(xiàng)試驗(yàn)的成果來說，不光要試驗(yàn)室保持良好的環(huán)境，器件試劑等方面也是一樣的。下面我們來說說ELISA試劑盒試驗(yàn)清潔的重要影響。1.洗板①保證洗液注滿各孔，洗板針疏通，洗完板后在吸水紙（挑選干凈、無或少...
2019
8-27

ELISA試劑盒顯色溫育反應(yīng)
ELISA試劑盒廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中，有著靈敏度高、特異性強(qiáng)、經(jīng)濟(jì)性較好等優(yōu)點(diǎn)，下面我們來說說ELISA試劑盒的顯色溫育反應(yīng)。ELISA試劑盒約40分鐘顯色達(dá)，隨即逐漸減弱，至2小時(shí)后即可*消退至無色。TMB的終止液有多種，疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉（SDS）等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長時(shí)間（12-24小時(shí)）不褪，是目視判斷的良好終止劑。此外，各類酸性終止液則會(huì)使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色，此時(shí)可用特定的波長（450nm）測讀吸光值。ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中...
2019
6-19

便攜式熒光定量PCR儀的產(chǎn)品特點(diǎn)及功能介紹
便攜式熒光定量PCR儀實(shí)時(shí)監(jiān)控，自動(dòng)陰陽性結(jié)果判斷，自動(dòng)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，相對、定量、多重定量，熔解曲線，基因突變，SNP，質(zhì)控圖形分析，PCR擴(kuò)展效率計(jì)算，高分辨熔解曲線等。便攜式熒光定量PCR儀，即可對目的基因進(jìn)行現(xiàn)場普及化快速檢測。將在30-120分鐘內(nèi)完成檢測。與此同時(shí)，實(shí)現(xiàn)了可同步檢測DNA、RNA混合樣本的檢測，應(yīng)用于基因組學(xué)、傳染病研究、干細(xì)胞研究、腫瘤和遺傳學(xué)疾病研究、藥物研究和個(gè)性化用藥、法醫(yī)鑒定、分子信號和免疫應(yīng)答通路、食品安全檢測、轉(zhuǎn)基因檢測、動(dòng)物源性成分分...
2019
3-25

哪些因素會(huì)影響ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)結(jié)果錯(cuò)誤？
血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本，標(biāo)本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致，ELISA試劑盒分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種：1．內(nèi)源性物質(zhì)普遍認(rèn)為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì)，可以不同程度影響檢測結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有：類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig（s）抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。(1)類風(fēng)濕因子人血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子（RF）可以與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標(biāo)記二抗的FC段直接結(jié)合，從而導(dǎo)致假陽...
2019
3-19

ELISA試劑盒使用時(shí)出現(xiàn)的問題如何解決？
ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。下面我們來說說ELISA試劑盒操作時(shí)出現(xiàn)的問題如何解決。一、選擇試劑選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。二、加樣可能原因：1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))；3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶...
2019
2-26

J2單克隆抗體的特異性及穩(wěn)定性了解
J2單克隆抗體的稀釋：10010200（200ug）加入220ul無菌蒸餾水稀釋，重懸后濃度：1.00mg/ml10010500(500ug)加入550ul無菌蒸餾水稀釋，重懸后濃度：1.00mg/ml由于凍干過程中，稀釋的抗體可能含有少量的變性蛋白聚合物，這些蛋白可能會(huì)對免疫組化實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生高背景。因此，我們推薦在使用前，抗體重懸后，需離心，使用其上清。J2單克隆抗體的特異性：J2單克隆抗體識(shí)別雙鏈RNA的螺旋是40或大于40bp的結(jié)構(gòu)。該抗體對雙鏈RNA的識(shí)別不依賴于抗原的序...
2019
2-22

J2單克隆抗體的制備過程介紹
J2單克隆抗體的制備過程：1.免疫動(dòng)物免疫動(dòng)物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠產(chǎn)生致敏B淋巴細(xì)胞的過程。一般選用6-8周齡雌性BALB/c小鼠，按照預(yù)先制定的免疫方案進(jìn)行免疫注射?？乖ㄟ^血液循環(huán)或淋巴循環(huán)進(jìn)入外周免疫器官，刺激相應(yīng)B淋巴細(xì)胞克隆，使其活化、增殖，并分化成為致敏B淋巴細(xì)胞。2.細(xì)胞融合采用二氧化碳?xì)怏w處死小鼠，無菌操作取出脾臟，在平皿內(nèi)擠壓研磨，制備脾細(xì)胞懸液。將準(zhǔn)備好的同系骨髓瘤細(xì)胞與小鼠脾細(xì)胞按一定比例混合，并加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下，各種淋巴細(xì)...

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